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在使用臺(tái)式BOD五日生化測(cè)定儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí),空白樣超標(biāo)會(huì)嚴(yán)重影響測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。為快速定位問(wèn)題,本手冊(cè)從多個(gè)維度梳理空白樣超標(biāo)的原因及排查方法。 一、實(shí)驗(yàn)用水問(wèn)題 實(shí)驗(yàn)用水質(zhì)量不佳是導(dǎo)致空白樣超標(biāo)的常見(jiàn)原因。若使用的蒸餾水或去離子水受到污染,含有機(jī)物或微生物,會(huì)在培養(yǎng)過(guò)程中消耗溶解氧,致使空白樣BOD值升高。排查時(shí),可先檢查制水設(shè)備是否正常運(yùn)行,如檢查去離子柱是否失效;同時(shí),對(duì)實(shí)驗(yàn)用水進(jìn)行微生物檢測(cè)或 TOC(總有機(jī)碳)檢測(cè),若檢測(cè)結(jié)果異常,應(yīng)更換新的實(shí)驗(yàn)用水,或使用更高級(jí)別的超純水重新進(jìn)行空白實(shí)驗(yàn),觀(guān)察空白樣數(shù)值變化。 二、試劑污染 BOD測(cè)定所需的試劑,如接種液、稀釋水添加的營(yíng)養(yǎng)鹽溶液等,若受到污染,會(huì)引入額外的生物活性物質(zhì)或有機(jī)物,導(dǎo)致空白樣超標(biāo)。檢查試劑的保質(zhì)期和儲(chǔ)存條件,觀(guān)察試劑是否渾濁、變色或有異味;對(duì)懷疑污染的試劑,可進(jìn)行空白對(duì)照實(shí)驗(yàn),即用新配制的試劑與原試劑分別進(jìn)行空白樣測(cè)定,對(duì)比結(jié)果。若新試劑空白樣正常,說(shuō)明原試劑存在問(wèn)題,需重新配制。 三、器皿不潔 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用的培養(yǎng)瓶、量筒、移液管等器皿若未徹底清洗干凈,殘留的有機(jī)物或清潔劑會(huì)污染空白樣。仔細(xì)檢查器皿內(nèi)壁是否有污漬殘留,尤其是培養(yǎng)瓶,其密封性和清潔度對(duì)結(jié)果影響較大。對(duì)所有使用的器皿重新進(jìn)行清洗,按照洗滌劑浸泡、清水沖洗、蒸餾水潤(rùn)洗的流程操作,必要時(shí)可使用高溫滅菌或酸浸泡等方法深度清潔,清潔后再次進(jìn)行空白實(shí)驗(yàn),判斷是否因器皿問(wèn)題導(dǎo)致超標(biāo)。 四、操作失誤 在稀釋水配制、接種液添加、樣品轉(zhuǎn)移等操作環(huán)節(jié)出現(xiàn)失誤,也會(huì)造成空白樣異常。例如,移液時(shí)未準(zhǔn)確吸取規(guī)定體積的溶液,或接種液添加量過(guò)多,都會(huì)使空白樣中微生物數(shù)量或有機(jī)物含量增加。重新核對(duì)操作步驟,檢查移液槍的準(zhǔn)確性和校準(zhǔn)情況;在操作過(guò)程中嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)流程執(zhí)行,避免交叉污染,如更換吸頭、使用專(zhuān)用器皿等,重新進(jìn)行空白樣測(cè)定,驗(yàn)證操作是否規(guī)范。 五、環(huán)境因素影響 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中的微生物、有機(jī)物氣溶膠等污染物,可能進(jìn)入空白樣中,導(dǎo)致空白值升高。檢查實(shí)驗(yàn)室是否存在通風(fēng)不良、衛(wèi)生條件差等問(wèn)題,是否有污染源靠近實(shí)驗(yàn)區(qū)域??蓪?duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清潔、消毒,加強(qiáng)通風(fēng)換氣,必要時(shí)在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行空白樣操作;同時(shí),檢查培養(yǎng)箱的溫度控制是否準(zhǔn)確,溫度波動(dòng)過(guò)大可能影響微生物生長(zhǎng),導(dǎo)致空白樣BOD值不穩(wěn)定,若溫度異常,需對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行校準(zhǔn)或維修。
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